CRISPR 编辑靶点设计

输入基因 ID、CDS、cDNA 或 DNA 序列,快速筛选 SpCas9(NGG PAM)候选靶点并按公开规则排序。页面只提供靶点与评分,不生成载体相关引物,也不将评分视作实验编辑效率。

真实数据示例

TkA01G000070 · TK1151 · CDS 1170 bp

直接运行示例下载示例FASTA

示例序列取自本站TK1151参考CDS,可查看基因卡片及参考来源。

查看算法、评分及证据边界

单次最多 250,000 bp;在完整输入上扫描两条链,超限会明确提示,不会删除歧义碱基或静默截断。

设计与评分规则

工具在正、负链扫描 20 nt guide 紧邻的 SpCas9 NGG PAM;切割位点按 SpCas9 规则标为 PAM 上游 3 bp。每条候选的总分限制在 0–100,仅用于本工具内的优先排序。

组成规则与分值
基础与 GC 平衡基础分 38;加 max(0, 24 − 1.15 × |GC% − 50|),因此 GC 接近 50% 时最高加 24 分。
PAM / 5′ 偏好NGG PAM 加 10;guide 首位为 G 加 6;在输入序列较靠前的位置加 0–18 分,用于优先靠近基因或 CDS/cDNA 5′端的候选。
序列惩罚guide 含 TTTT 减 12;任一单碱基连续 5 个及以上减 8。最后将结果截断为 0–100。

评分是可复现的序列优先级规则,不是体内编辑效率或脱靶风险预测。后续载体、启动子、递送方式和靶外验证应由具体实验体系单独确定。

候选靶点

尚无结果;请输入基因 ID 或有效 DNA 序列。